大鼠雪旺細(xì)胞培養(yǎng)方法

大鼠雪旺細(xì)胞培養(yǎng)方法

　　（一）植塊法：

　　植塊法原理是成纖維細(xì)胞的增殖速度要比施萬(wàn)細(xì)胞快，通過(guò)反復(fù)的貼壁便可以獲得較高純度的施萬(wàn)細(xì)胞。此方法培養(yǎng)的周期較長(zhǎng)，且培養(yǎng)過(guò)程中伴隨著細(xì)胞活性及分裂能力的下降。

　　（二）酶消化法：

　　酶消化法的主要原理是用酶去除組織中的間質(zhì)，使組織更為分散而使細(xì)胞呈單層排列。采用組織塊反復(fù)種植純化法、低濃度胰酶快速消化和差速貼壁法對(duì)施萬(wàn)細(xì)胞進(jìn)行純化，結(jié)果施萬(wàn)細(xì)胞活性較高，純度可達(dá)90%以上，細(xì)胞(大鼠雪旺細(xì)胞)所受到的外界因素影響也較少。

　　（三）三維培養(yǎng)法：

　　植塊法、酶消化法主要是基于二維培養(yǎng)方法，然而體外細(xì)胞培養(yǎng)的一個(gè)重要原則是需模擬體內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境，該模擬系統(tǒng)中*重要的核心因素是細(xì)胞與培養(yǎng)環(huán)境之間的相互作用。不同于傳統(tǒng)的二維化單層細(xì)胞培養(yǎng)，三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是將具有三維結(jié)構(gòu)不同材料的載體與各種不同種類的細(xì)胞在體外共同培養(yǎng)，使細(xì)胞能夠在載體的三維立體空間結(jié)構(gòu)中遷移、生長(zhǎng)，構(gòu)成三維的細(xì)胞載體復(fù)合物。三維細(xì)胞培養(yǎng)是將細(xì)胞培植在一定的細(xì)胞外基質(zhì)中，(大鼠雪旺細(xì)胞)細(xì)胞外基質(zhì)蛋白充當(dāng)生長(zhǎng)支架，使得細(xì)胞能夠分化產(chǎn)生一定的三維組織特異性結(jié)構(gòu)，所創(chuàng)建的細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境則*大程度地模擬體內(nèi)環(huán)境。在施萬(wàn)細(xì)胞的培養(yǎng)中也有學(xué)者采用該方法進(jìn)行培養(yǎng)，在培養(yǎng)液中放入三維支架，使細(xì)胞貼壁，形成Bungner帶，支架的主要材料是膠原，其次還有聚酯纖維、聚乳酸等。有研究者采用三維自組裝多肽水凝膠作為基質(zhì)三維培養(yǎng)人胎兒施萬(wàn)細(xì)胞，結(jié)果培養(yǎng)出的施萬(wàn)細(xì)胞活性較高，細(xì)胞形態(tài)更加典型，且0.25%水凝膠效果*佳，能夠形成良好的形成納米纖維支架結(jié)構(gòu)。內(nèi)邊緣和兩端外，還見(jiàn)于髓鞘板層內(nèi)的施－蘭切跡。該切跡構(gòu)成螺旋形的胞質(zhì)通道，并與細(xì)胞外、內(nèi)邊緣的胞質(zhì)相通。

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