Immortalized Human Esophageal Epithelial Cells (NE2-hTERT) T0632
永生化人食管上皮細胞(NE2-hTERT) 上海 安徽 合肥 ABM細胞庫
15000元 貨期2周
Print Version | |
BioSafety Level | II |
Organism | Homo sapiens |
Source Organ | Esophageal mucosa |
Donor Age | 52 |
Donor Gender | Male |
Growth Properties | Adherent |
Morphology | Epithelial-like |
Recommended Seeding Density | Thaw entire contents into an appropriate T25 flask as specified in the Propagation instructions. |
Markers | CK5, CK6, CK8, CK13, Ck18, CK19 |
Applications | For Research Use Only |
Immortalization Method | Serial passaging and transduction with retroviruses carrying hTERT gene |
Description | The Immortalized Human Esophageal Epithelial Cells (NE2-hTERT) retains epithelial morphology and can be used as a reliable supply of normal esophageal epithelial cells. The cells expresses cytokeratins 5, 6, 8, 13, 18, and 19. Whereas 6 and 18 are markers for proliferating epithelial cells while 8, 13, 18, and 19 are markers for esophageal squamous cells respectively. NE2-hTERT cells do not grow anchorage-independently and are not tumorigenic. It is recommended for applications in studies of esophageal epithelial cell functions and development of esophageal cancer. |
Procedure Overview |
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Propagation | The complete media for this cell line is 1:1 ratio of Defined Keratinocyte-SFM (DKSFM) with supplements (Gibco, #10744-019) and Epilife medium with EDGS (CAS:cade Biologics #M-EPI-500-CA; #S-012-5) . Atmosphere: air: 95%, CO?: 5%; Temperature: 37.0°C. |
Subculturing |
To subculture from T-25 (1:3): 1. Remove media and wash with 2 m 1X PBS 2. Add 0.5 ml Trypsin-EDTA (TM050) (abm TM050) 3. Put flask into 37°C incubator for ~2 minutes or until cells detach 4. Neutralize using 3 ml of DKSFM supplemented with 2% FBS 5.Transfer cells to 15 ml tube and centrifuge at 700 rpm for 4 minutes at room temperature 6. Remove supernatant 7. Add 2 ml complete media to each flask 8. Resuspend cells with 1.5 ml complete medium 9. Add 0.5 ml resuspension into each flask containing 2 ml complete medium 10. Incubate in 37°C incubator with 5% CO? overnight 11. Next day remove media, and add 5 ml of complete media to each flask Be sure to use T25 ECM-coated flasks(G299) for growth. |
Preservation |
To freeze down from T-25 (1:2): 1. Remove media and wash with 2 m 1X PBS 2. Add 0.5 ml Trypsin-EDTA (abm TM050) 3. Put flask into 37°C incubator for ~2 minutes or until cells detach 4. Neutralize using 3 ml of DKSFM supplemented with 2% FBS 5. Transfer cells to 15 ml tube and centrifuge at 700 rpm for 4 minutes at room temperature 6. Remove supernatant 7. Add 2 ml complete media to each flask 8. Resuspend cells with 1 ml complete medium 9. Add 1ml of freezing medium (TM024) 10. Transfer 1 ml aliquot into each cryopreservation vial, and freeze 11. Transfer to liquid nitrogen tank the next day for long term storage |
Quality Control | 1) Immunostaining and Western blot were preformed for cell characterization |
Disclaimer | |
聯系方式 |
何經理,合肥星肽生物科技有限公司,Tel:0551-63802898 400-8702-898, E-mail:info@qingbio.com http://www.k85n.com QQ:514713116 |
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